Sérologický krevní test na IgG protilátky proti houbám Aspergillus | Katalog analýz lékařské laboratoře EndoMedLab (Moskva, Novodmitrovskaya St, 5A, budova 2).

Exogenní alergická alveolitida (EAA) je obecný název pro skupinu alergických pneumopatií, ke kterým dochází v důsledku alergické reakce plicní tkáně na intenzivní a dlouhodobé vdechování určitého antigenu. Onemocnění je difuzní granulomatózní zánětlivý proces alveolů a intersticiální tkáně plic, vyvíjející se pod vlivem intenzivní a dlouhodobé inhalace organických a anorganických antigenů. V literatuře existují další názvy pro tuto patologii: „hypersenzitivní pneumonitida“, „inhalační pneumopatie“, „difuzní intersticiální pneumonie“, „intersticiální granulomatózní pneumonitida“, „obilná horečka“, „farmářské plíce“. EAA patří do skupiny pneumokonióz, které se vyvinou z expozice aerosolům toxicko-alergického účinku. EAA je také klasifikována jako skupina fibrotizující alveolitidy se stanovenou etiologií. EAA je považována za imunopatologické onemocnění, v jehož rozvoji mají hlavní roli alergické reakce 3. a 4. typu.

Etiologie. V současné době je známo velké množství alergenů, které mohou způsobovat EAA. Patří sem bakteriální faktory (termofilní aktinomycety atd.), houbové faktory (včetně hub rodu Aspergillus), biologicky aktivní látky živočišného původu (nejčastěji odpadní produkty zvířat a ptáků), antigeny rostlinného původu (piliny, částice bavlny, len atd.), léčivé antigeny, kovy, slitiny, polymery. Nejčastěji je EAA nemoc z povolání a vyskytuje se u dospělých.

Četná klinická pozorování v posledních letech přitom naznačují možnost onemocnění EAA nejen vlivem průmyslových faktorů, ale také v důsledku znečištění životního prostředí – ovzduší, vody, půdy, jakož i v souvislosti s faktory domácího prostředí. . Nejvýznamnějšími nepříznivými faktory v domácím prostředí jsou termofilní aktinomycety, antigeny ptáků, zvířat a houbové alergeny.

U dětí se EAA obvykle vyskytuje právě díky kontaktu s různými alergeny v domácím prostředí. Onemocnění může být spojeno zejména s tím, že dítě žije ve vlhkých oblastech nebo je v těsném kontaktu s domácími zvířaty a ptáky.

Mezi houbovými antigeny v EAA má největší význam Aspergillus. Různé druhy Aspergillus jsou spojovány s rozvojem onemocnění, jako jsou „plíce sladových kuchařů“, „plíce výrobců sýrů“, suberóza (onemocnění, které se vyvíjí u těch, kteří pracují s kůrou korku). Aspergillus fumigatus může způsobit rozvoj alveolitidy u městských obyvatel, protože je častým obyvatelem vlhkých, nevětraných, teplých místností.

Klinický obraz exogenní alergické alveolitidy.

Existuje akutní, subakutní a chronická alergická alveolitida. Povaha průběhu exogenní alergické alveolitidy je dána délkou kontaktu s antigenem: přerušovaný kontakt s antigenem vede k akutním reakcím, dlouhodobý kontakt vede k chronickému progresivnímu procesu, kdy je extrémně obtížné podezření na jeho alergickou genezi. Hlavní stížností pacientů s EAA je inspirační dušnost, kašel, většinou suchý, méně často s výtokem řídkého hlenovitého sputa.

U akutní formy onemocnění 4–12 hodin po kontaktu s podezřelým antigenem zimnice, zvýšená tělesná teplota, dušnost, suchý kašel nebo s řídkým hlenovým sputem, celková slabost, bolesti na hrudi, svalech, kloubech, a objeví se bolest hlavy. V některých případech se mohou objevit záchvaty dýchacích potíží a vazomotorická rýma. V případě zastavení kontaktu s antigenem mohou uvedené příznaky vymizet bez léčby během 12–48 hodin.

Subakutní průběh EAA je pozorován, když je tělo vystaveno malým dávkám antigenu po dobu jednoho týdne až 4 měsíců. Hlavní stížností je dušnost se střední fyzickou námahou. Při recidivách onemocnění se dušnost zesiluje, objevuje se suchý kašel nebo s malým množstvím hlenovitého sputa, nízká nebo horečnatá tělesná teplota, zvýšená únava, snížená chuť k jídlu a hubnutí.

Vznik chronické formy EAA napomáhá dlouhodobý (více než 4 měsíce, často mnoho let) kontakt s malými dávkami antigenu, který se projevuje progresivní dušností, cyanózou a hubnutím. Příznaky chronické bronchitidy (kašel s hlenovitým sputem) jsou pozorovány u 20–40 % případů.

Protilátky proti Aspergillus fumigatus třídy IgG jsou významně zvýšené u pacientů s exogenní alveolitidou, plicní a extrapulmonální aspergilózou. Detekce protilátek potvrzuje diagnózu, nicméně vzhledem k různým příčinám exogenní alveolitidy absence protilátek onemocnění nevylučuje, ale snižuje pravděpodobnost, že příčinou je aspergilóza.

Plicní aspergilóza

Mezi hlavní formy plicní aspergilózy patří:

1) alergická bronchopulmonální aspergilóza (ABPA)obvykle se vyvíjí na pozadí bronchiálního astmatu nebo cystické fibrózy

2) chronická plicní aspergilóza (CPA)se zpravidla vyvíjí u imunokompromitovaných pacientů na pozadí ABPA, CHOPN, sarkridózy a častých respiračních infekcí

3) invazivní plicní aspergilóza (IPA)se zpravidla vyvíjí u imunokompromitovaných pacientů (včetně pacientů s hematologickými malignitami, pacientů infikovaných HIV, pacientů po cytotoxické a imunosupresivní léčbě, po transplantaci orgánů). Po chřipce H1N1 a COVID-19 byly hlášeny případy invazivní aspergilózy.

Alergická bronchopulmonální aspergilóza (ABPA) – chronické infekčně-alergické onemocnění dýchacího ústrojí způsobené houbami rodu Aspergillus. Patogeneze je založena na zvýšené citlivosti na houbové antigeny, která se vyskytuje především u 1. a 3. typu alergických reakcí. Onemocnění probíhá jako progresivní bronchiální astma a je provázeno rozvojem endo- a peribronchiálního zánětu na úrovni středně velkých bronchů. Fixace imunitních komplexů ve stěně průdušek vede k jejich poškození a modifikaci antigenních charakteristik bronchiálních tkání. Chronický zánět je doprovázen produktivní reakcí pojivové tkáně, a to je příčinou rozvoje plicní fibrózy. ABPA je charakterizována eozinofilií periferní krve, zvýšenými hladinami sérového imunoglobulinu E (IgE), specifickými IgE a IgG protilátkami a charakteristickými rentgenovými příznaky. Detekce specifických IgE a/nebo IgG vůči Aspergillus fumigatus je součástí diagnostických kritérií pro ABPA.

Diagnostická kritéria ABPA:

• bronchiální astma (bez ohledu na závažnost);
• přetrvávající a přechodné infiltráty v plicích;
• pozitivní kožní testy s antigenem A. fumigatus;
• eozinofilie periferní krve > 500 mm3;
• stanovení specifických IgE a IgG vůči A. fumigatus;
• celková hladina IgE > 1 000 ng/ml;
• izolace houbové kultury A. fumigatus ze sputa nebo výplachů průdušek;
• přítomnost centrálních bronchiektázií

Chronická plicní aspergilóza (CPA) je vzácné a obtížně diagnostikovatelné plicní onemocnění, které komplikuje mnoho dalších respiračních onemocnění. Nejběžnější formou CPA je kavitární CPA (CCPA) (s tvorbou dutin), která, pokud se neléčí, se může přeměnit na chronickou fibrotizující CPA. Mezi méně časté projevy CPA patří aspergilové uzliny a solitární aspergilom. Všechny tyto změny se vyskytují u imunokompromitovaných pacientů s různými plicními chorobami. Subakutní invazivní plicní aspergilóza (dříve nazývaná chronická nekrotizující plicní aspergilóza) je rychle progredující (< 3 měsíce) infekce obvykle diagnostikovaná u pacientů s mírnou imunodeficiencí a měla by být léčena jako invazivní aspergilóza.

V roce 2016 Evropská respirační společnost (ERS) spolu s Evropskou společností klinické mikrobiologie a infekčních chorob (ESCMID) formulovala pro CPA následující diagnostická kritéria:

• chronický (více než 3 měsíce) průběh onemocnění,
• přetrvávající změny na CT vyšetření plic,
• detekce specifických imunoglobulinových IgG nebo precipitinů proti Aspergillus v krevním séru,
• identifikace mycelia Aspergillus spp. v obarvených nátěrech nebo bioptickém materiálu,
• izolace Aspergillus spp. při inokulaci bioptického materiálu, bronchoalveolární laváž (BAL), sputa,
• vyloučení alternativních onemocnění (pokud existuje více než jedna dutina).

Stanovení IgG specifického pro Aspergillus fumigatus v krevním séru je klíčovým diagnostickým znakem CPA. Protilátky proti Aspergillus (precipitiny) jsou zvýšené u >90 % pacientů. Při účinné léčbě hladiny protilátek pomalu klesají, ale zřídka zcela vymizí. Prudké zvýšení titru protilátek je obvykle známkou neúčinné terapie nebo relapsu infekce.

Invazivní plicní aspergilóza (IPA).

Nejčastějšími klinickými příznaky IPA u pacientů s neutropenií jsou horečka nad 38 °C trvající déle než 96 hodin, neproduktivní kašel, bolest na hrudi, hemoptýza a dušnost, refrakterní na širokospektrá antibiotika. Klinické příznaky se obvykle objevují po 10–12 dnech agranulocytózy. U 10–15 % pacientů není zaznamenáno zvýšení tělesné teploty. Někdy projevy IPA připomínají známky trombózy větví plicní tepny: náhlá bolest na hrudi a dušnost. Mortalita u IPA u pacientů s neutropenií se pohybuje od 35 do 60 % a závisí na době zahájení léčby a obnovení krvetvorby.

Charakteristickými rysy klinických projevů IPA u příjemců allo-HSCT ve srovnání s pacienty s neutropenií je rozvoj klinických příznaků pozdě po transplantaci, velmi rychlá progrese, často absence horečky u pacientů užívajících steroidy a také velmi vysoká (>50 %) výskyt poškození mimoplicních orgánů, zejména centrálního nervového systému. Kromě toho je mortalita při IPA u příjemců allo-HSCT významně vyšší než u pacientů s neutropenií, pohybuje se od 80 do 90 %.

Mezi extrapulmonální invazivní formy aspergilózy patří akutní invazivní aspergilová rinosinusitida, diseminovaná IA, aspergilóza centrálního nervového systému, diseminovaná IA s kožními lézemi, aspergilová osteomyelitida, aspergilová perikarditida.

Pro diagnostiku IA u neutropenických pacientů se jednoznačně doporučuje stanovit hladinu galaktomananu v krevním séru nebo tekutině BAL.

Aspergilóza, Aspergillus fumigatus IgG, aspergillus, hypersenzitivní pneumonitida, inhalační pneumopatie, difuzní intersticiální pneumonie, intersticiální granulomatózní pneumonitida, obilná horečka, farmářské plíce,

sérologický krevní test, při kterých jsou detekovány specifické protilátky třídy G (IgG) proti původci aspergilózy – Aspergillus houby, se provádí k diagnostice aktuálního infekčního onemocnění a vyhodnocení účinnosti jeho léčby.

Aspergilóza je patologický proces způsobený poškozením dýchacích cest plísňovými houbami. Existuje několik typů onemocnění:

• bronchopulmonální, vyskytující se pod rouškou tracheo-bronchitidy – pacienti si stěžují na horečku, silnou slabost, bolestivý kašel s uvolňováním viskózního sputa;
• plicnívyznačující se diseminovaným průběhem – původce infekce se šíří lymfogenní cestou a postihuje celé tělo;
• septický – vyskytuje se u starších lidí a osob s HIV statusem, patogenní houby pronikají do mozku a viscerálních orgánů;
• alergický – těžká forma bronchiálního astmatu a bronchiektázie, která postihuje pracovníky na pilách, drůbežích farmách, tkalcovnách a zemědělských podnicích;
• fibrotizujícíovlivňující kosterní systém.

Poté, co Aspergillus pronikne do těla, jsou spuštěny ochranné mechanismy – tvorba specifických protilátek zaměřených na neutralizaci infekčního agens. IgG je detekován na počátku onemocnění a je přítomen v cirkulující krvi po dobu nejméně 1 roku.

Houby rodu Aspergilius jsou klasifikovány jako vysoce alergenní patogeny kvůli jejich schopnosti tvořit toxiny a enzymy. Jejich odpadní látky působí na organismus negativně. Účinné látky patogenu ničí buněčnou stěnu, což vede ke změnám chemických sloučenin a reakcím uvnitř ní. To, co dělá Aspergillus zvláštní, je jejich schopnost uvolňovat toxiny do životního prostředí.

Příčiny aspergilózy

Původci infekce u lidí mohou být různé druhy plísní. Aspergillus patří k aerobům a heterotrofům. Jsou schopny přežít a rozmnožovat se až do 50° Celsia a jsou dobře konzervované, když jsou zmrazené a sušené. Šíření plísní je pozorováno všude.

Jsou přítomny ve vzduchu, půdě, na rostlinách, ventilačních systémech a zvlhčovačích vzduchu, ve starých věcech a vlhkých místnostech. K infekci plísní může dojít při různých lékařských výkonech, to znamená při instrumentálním vyšetření pacienta (punkce vedlejších nosních dutin, při odběru materiálu na biopsii při endoskopickém vyšetření).

Přenosové trasy

Infekce se může objevit různými způsoby, například:

• ve vzduchu – tato cesta je převládajícím způsobem přenosu patogenu. Do těla se dostává vdechováním vzduchu obsahujícího spory plísní, tedy reprodukční strukturu hub určených k rozmnožování. Poskytují odolnost vůči přežití ve vnějším prostředí;
• Kontakt — kontakt spór patogenu s poškozenými sliznicemi nebo kůží může vést k infekci těla;
• voda-jídloplíseň může proniknout dovnitř s potravinami nebo vodou kontaminovanou sporami patogenů.

Přenašeči aspergilózy jsou ptáci, nejčastěji holubi, a nakažený člověk, uvolňující spory do vnějšího prostředí. Houby během své životní činnosti produkují enzymy.

Některé z nich (fosfolipázy, metaloproteinázy, aspartátové proteázy) mohou u přecitlivělých jedinců vyvolat těžkou alergickou reakci. Bez ohledu na formu onemocnění, infekční nebo alergické, způsobené houbou, dochází k poškození různých orgánů nebo jejich oblastí.

Faktory, které zvyšují riziko infekce

Trvalá imunita chrání tělo před nemocemi způsobenými černou plísní. Existuje však řada faktorů, které snižují jeho ochranné schopnosti, což může zhoršit průběh onemocnění. Tyto zahrnují:

• neutropenie po dlouhou dobu způsobená užíváním cytostatických, kortikosteroidních léků ve vysokých dávkách;
• diabetes mellitus;
• dlouhodobá intoxikace v důsledku popálenin, nehojících se ran;
• zhoubné novotvary;
• antibakteriální terapie ve vysokých dávkách po dlouhou dobu;
• chronický alkoholismus s poruchou funkce jater;
• onemocnění imunitního systému (dermatomyozitida, bronchiální astma, revmatoidní artritida).

Když se patogen dostane do těla, vyvolá produkci protilátek třídy G proti houbám Aspergilius, které jsou detekovány laboratorními testy.

Příznaky aspergilózy

Aspergillus může ovlivnit různé orgány. V současné době je plicní aspergilóza nejčastější a studovanou patologií plicního systému. Počáteční projevy onemocnění se často skrývají pod rouškou bronchitidy nebo tracheobronchitidy a projevují se následujícími příznaky:

• celková slabost a malátnost;
• kašel s šedavým sputem;
• periodická hemoptýza;
• ztráta tělesné hmotnosti.

Pokud proces zasáhne plíce, rozvine se aspergilová pneumonie, která zhorší symptomy a stav pacienta. Akutní stadium onemocnění je doprovázeno horečkou, zimnicí, dušností a bolestí na hrudi. Kašel se stává výraznějším a je doprovázen uvolněním hlenu nebo hnisavého sputa ve velkém množství.

Někdy můžete z dechu cítit plesnivý zápach. Vizuální vyšetření nátěrů sputa pod mikroskopem odhalí spory a kolonie mycelia hub.

Doprovodná onemocnění plicního systému (fibróza, emfyzém) mohou zhoršit průběh onemocnění a vyprovokovat vznik plicního aspergilomu. Jedná se o ohnisko zapouzdřené formy v plicích, uvnitř kterých je hlen, buněčné prvky a vláknité procesy houby. Aspergilom může být smrtelný v důsledku asfyxie nebo plicního krvácení.

S ohledem na závažnost onemocnění, progresi plicní aspergilózy a špatnou prognózu má včasná diagnostika onemocnění prvořadý význam.

Kdy se provádí test IgG protilátek proti houbám Aspergillus?

Provedení imunologického krevního testu Anti-Aspergillus je nezbytný pro:

• diagnostika a klinické odlišení aspergilózy od jiných mykóz, tuberkulózy, maligní patologie;
• atypický průběh onemocnění dýchacích cest;
• vývoj komplikací pooperačního období orgánů ORL;
• imunodeficience;
• podezření na generalizovanou formu infekčního procesu.

Jak se připravit na krevní test?

Biologický materiál – vzorek žilní krvePro výzkum se používá sérum bez fibrinogenu. Výběr BM se provádí ráno (od 8.00:11.00 do 4:XNUMX), na lačný žaludek – období hladovění by mělo trvat nejméně XNUMX hodiny.

V předvečer procedury by měl pacient:

• omezit kouření, fyzickou a dietní aktivitu;
• snížit psycho-emocionální stres;
• Vyhněte se užívání léků a pití alkoholu.

Diagnóza aspergilózy

V diagnostice patologického procesu hrají důležitou roli klinické projevy infekce. Aspergilóza se může objevit s příznaky různého stupně závažnosti. Někdy může být klinický obraz rozmazaný nebo se proces stává asymptomatickým.

V tomto případě bude hlavní metodou k potvrzení přítomnosti aspergilózy laboratorní diagnostika. Biologickým materiálem může být sputum, škrábance z hladké kůže a nehtů, výtok z dutin nebo zevního zvukovodu. Aspergillus lze detekovat různými metodami, jako jsou:

• vizuálně pomocí mikroskopu;
• setí plodin;
• metoda PCR (polymerázová řetězová reakce), založená na laboratorním studiu fragmentu DNA v odebraném materiálu;
• sérologická reakce ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay), která umožňuje přesně určit přítomnost protilátek třídy G proti infekčnímu agens;
• imunochemiluminiscenční automatizovaná analýza, která má vyšší senzitivitu, informační obsah, specificitu a výzkum zabere kratší dobu.

Laboratorní diagnostika na přítomnost protilátek proti houbám Aspergilius umožňuje jejich identifikaci v počáteční fázi onemocnění, což je důležitý bod pro zahájení léčebných opatření.

Rozluštění krevního testu

Pochybný výsledek – titr protilátek 0,90 – 1,1 U/l. Je nutný opakovaný výzkum.

Uvažuje se o koncentraci specifických protilátek izotypu G proti Aspergillus > 1,1 U/l pozitivní výsledek, což naznačuje aktuální nebo nedávný infekční proces.

Konečné údaje mikrobiologické analýzy mohou být ovlivněny přítomností zkřížené imunitní reakce na jiný infekční patogen nebo potravinový alergen.